荧光素酶报告基因的发展
1、双荧光素酶报告基因测试∶ 结合萤火虫和海洋腔肠荧光素酶先进的共报告基因测试技术在用萤火虫荧光素酶定量基因表达时， 通常采用第二个报告基因来减少实验的变化因素。但传统的共报告基因（比如CAT，β-Gal， GUS）不够便利，因为各自的测试化学，处理要求检测特点存在差异。
2、①非放射性；②比CAT及其他报告基因速度快；③比CAT灵敏100倍；④荧光素酶在哺乳细胞中的半衰期为3小时，在植物中的半衰期为3．5小时。由于半衰期短，故启动子的改变会即时导致荧光素酶活性的改变，而荧光素酶不会积累。相反，CAT在哺乳细胞中的半衰期为50小时。
3、荧光素酶报告基因实验（luciferase assay）是检测这类转录因子和其靶启动子中的特异顺序结合的重要手段。其原理简述如下：（1）构建一个将靶启动子的特定片段插入到荧光素酶表达序列前方的报告基因质粒，如pGL3-basic等。（2） 将要检测的转录因子表达质粒与报告基因质粒共转染293细胞或其它相关的细胞系。
4、在基因功能研究的广阔领域中，一种强大的工具被科学家们广泛应用，那就是双荧光素酶报告分析。
5、荧光素酶报告基因：揭示生物发光的秘密与广泛应用\n\n荧光素酶报告基因（Luc），如同萤火虫的神秘光点，是一种基于荧光素（luciferin）与萤火虫荧光素酶（firefly luciferase）的生物标记技术。
6、其中一种荧光素酶作为报告基因，另一种则作为内参，主要作用是减少外界因素对于实验数据产生的影响，这些影响主要包括操作误差、细胞接种差异、细胞处理的误差、孔间增殖差异等因素。
有谁用过碧云天双荧光素酶报告基因检测试剂盒
Promega提供了一种先进的双报告基因技术（Dual-reporter assays），结合了萤火虫荧光素酶测试和海肾荧光素酶测试，该技术同时使用两个独立的报告基因以提高实验的准确性，Biotek synergy 系列微孔板检测仪作为双报告基因的检测分析平台获得了Promega DLR 认证。
以Promega公司双荧光素酶检测试剂盒为例： 试剂准备 按照说明书配制PLB细胞裂解液、LAR II检测液、Stop&Glo检测液。
验证microRNA同mRNA靶向互作。将待测基因的3’UTR序列插入报告基因载体，再共转入该microRNA，检测荧光素酶活性下降，则提示为其靶序列。验证microRNA同lncRNA靶向互作。将待测lncRNA序列插入报告基因载体的3’UTR区域，检测荧光素酶活性。启动子结构分析。
细胞凋亡试剂盒的结合液对细胞有毒性 可以用来检测组织细胞在凋亡晚期过程中细胞核DNA的断裂情况。
样品和测定试剂混合后，必须等待1-2秒，再进行测定。测定时间通常为10秒，根据情况也可以测定更长或更短时间，但是同一批样品最好使用相同的测定时间。
双荧光素酶应用实例(一)
结果显示，WRKY46明显抑制由完整ALMTI启动子（P1） 带动的荧光素酶的活性，但不影响5端缺失的启动子（P2） 带动的荧光素酶活性， 说明缺失的启动子序列（含6个W-box 元件）对WRKY46与ALMTI启动子的相互作用至关重要。例子4 例子5---启动子结构分析。
深入探索双荧光素酶实验：揭示其奥秘与广泛应用在现代生物科学研究中，双荧光素酶实验凭借其卓越的灵敏度和广泛的适用性，已成为miRNA靶基因验证、转录因子调控等领域不可或缺的工具。这个实验的核心理念源自自然界中的萤火虫和海肾荧光素酶，通过构建精密的荧光酶表达载体，实现对细胞调控效应的精确评估。
在基因功能研究的广阔领域中，一种强大的工具被科学家们广泛应用，那就是双荧光素酶报告分析。
常用的荧光素酶载体如pGL3-Basic、pRL-TK和pmirGLO，为各种基因研究提供了丰富的构建平台。从microRNA-mRNA靶向互作的验证，到启动子结构和SNP分析，双荧光素酶的应用范围广泛且精准。
什么是报告基因检测法?
报告基因 （reporter gene）是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因，也就是说，是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。把它的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因，或与其它目的基因相融合，在调控序列控制下进行表达，从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控，筛选得到转化体。
报告基因（reporter gene）是一种编码可易于鉴定的蛋白质或酶的基因，可用于标定目的基因的表达调控，并筛选得到转化成功的生物个体，通常称为转化体。
详细解释：报告基因是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因，也就是说，是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。
“基因”为英语“gene”的音译，是DNA（脱氧核糖核酸）分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列的总称，是具有遗传效应的DNA分子片段，是控制生物性状的基本遗传单位，是生命的密码，记录和传递着遗传信息。所有的基因都由4种碱基组成。
Luciferase报告基因系统是以荧光素（luciferin）为底物来检测萤火虫荧光素酶（fireflyluciferase）活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中，会发出生物荧光（bioluminescence）。
在生物科学研究的前沿，双荧光素酶报告基因检测系统如同两颗璀璨的星星，照亮了基因表达的复杂世界。它基于两种天然荧光酶——萤火虫荧光素酶（Firefly Luciferase， 61kDa）和海肾荧光素酶（Renilla Luciferase， 36kDa），构建出一套精密的实验平台。